擬南芥種子
擬 南 芥 種 子
● 產(chǎn)品規(guī)格
貨號(hào)
名稱
規(guī)格
保存條件
擬南芥Col-0種子
AS5001
0.2ml/支, 0.5ml/支, 1ml/支
4℃干燥
擬南芥Ler種子
AS5010
0.2ml/支, 0.5ml/支, 1ml/支
4℃干燥
● 產(chǎn)品說明
擬南芥(Arabidopsis thaliana) 屬于十字花科,是二年生草本植物,在生物實(shí)驗(yàn)中擬南芥經(jīng)常被選擇作為模式植物,原因有三:首先,擬南芥只有5對(duì)染色體,數(shù)目很??;其次,擬南芥發(fā)育生長(zhǎng)周期極快,在短期內(nèi)就能繁育很多代,滿足變異和進(jìn)化的要求,最后擬南芥每次生產(chǎn)數(shù)千枚種子滿足遺傳上統(tǒng)計(jì)的要求。擬南芥的基因組是目前已知植物基因組中最小的,大約為12500萬堿基對(duì)。擬南芥植株小、結(jié)子多、自花受粉,基因高度純合,并且種植方便,生長(zhǎng)周期短,條件易得,遺傳轉(zhuǎn)化方法簡(jiǎn)單,是進(jìn)行遺傳學(xué)研究的理想材料,被科學(xué)家譽(yù)為“植物中的果蠅”。擬南芥無菌培養(yǎng),普遍使用的是1倍或0.5倍濃度的MS培養(yǎng)基,也有使用GamborgB5培養(yǎng)基。
● 操作方法
1. 取保存的野生型種子適量,倒入1.5ml的離心管中,加入無菌水,震蕩數(shù)次,高速離心15s,將上清及漂浮的種子棄掉。
2. 向離心管中加入1ml的 70%乙醇,震蕩10s,用移液器小心地移除上清。
3. 向離心管中加入1ml的無菌去離子水ddH2O,震蕩后吸除,重復(fù)兩次。
4. 向離心管中加入1ml的3%次氯酸鈉溶液,在渦旋振蕩器上強(qiáng)力震蕩10min,用移液器小心地移除上清。
5. 向離心管中加入1ml的無菌去離子水ddH2O,震蕩后吸除,重復(fù)3次以上。
6. 向離心管中加入500μl的無菌去離子水ddH2O,震蕩后,將種子傾倒在含有無菌濾紙的培養(yǎng)皿中。
7. 待水稍干以后,用小鑷子取擬南芥種子點(diǎn)種到已經(jīng)晾干的MS培養(yǎng)基平板上。
8. 用封口膜封好培養(yǎng)皿,寫好標(biāo)簽。
9. 將封好的平板放到4℃的冰箱2-3d,進(jìn)行春化處理,打破種子休眠期。
10. 將春化處理后的平板放入組織培養(yǎng)室(22℃-23℃),培養(yǎng)3-4d,種子即萌發(fā)。
11. 在培養(yǎng)室培養(yǎng) 7-10d,幼苗長(zhǎng)出兩片真葉以后,即可進(jìn)行大量移栽。
● 注意事項(xiàng)
1. 因幼苗長(zhǎng)出真葉后即可移栽,MS培養(yǎng)基的蔗糖含量控制在1%-2%即可。
2. 用70%乙醇進(jìn)行種子表面消毒時(shí),時(shí)間不宜過長(zhǎng),因?yàn)閿M南芥種皮較薄,乙醇極易滲入,殺傷種子。
3. 點(diǎn)種種子時(shí),避免種子擠到一起,防止根交錯(cuò)到一起。
4. 如果種子收獲后超過3個(gè)月,可以不用進(jìn)行春化處理。
5. 放置培養(yǎng)皿時(shí),前幾天可以倒置放置,當(dāng)根生成后改為平放,防止根向上生長(zhǎng)。
6. MS培養(yǎng)基可用B5培養(yǎng)基代替。
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