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如何獲得擬南芥無菌苗？

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2025/3/11 瀏覽次數(shù)：

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問：如何獲得擬南芥無菌苗？

答：擬南芥無菌苗獲取步驟如下：

1. 取保存的擬南芥種子適量，倒入1.5ml的離心管中，加入無菌水，震蕩數(shù)次，高速離心15s，將上清及漂浮的種子棄掉。

2. 向離心管中加入1ml的 70％乙醇，震蕩10s，用移液器小心地移除上清。

3. 向離心管中加入1ml的無菌去離子水ddH2O，震蕩后吸除，重復兩次。

4. 向離心管中加入1ml的3％次氯酸鈉溶液，在渦旋振蕩器上強力震蕩10min，用移液器小心地移除上清。

5. 向離心管中加入1ml的無菌去離子水ddH2O，震蕩后吸除，重復3次以上。

6. 向離心管中加入500μl的無菌去離子水ddH2O，震蕩后，將種子傾倒在含有無菌濾紙的培養(yǎng)皿中。

7. 待水稍干以后，用小鑷子取擬南芥種子點種到已經(jīng)晾干的MS培養(yǎng)基平板上。

8. 用封口膜封好培養(yǎng)皿，寫好標簽。

9. 將封好的平板放到4℃的冰箱2-3d，進行春化處理，打破種子休眠期。

10. 將春化處理后的平板放入組織培養(yǎng)室（22℃-23℃），培養(yǎng)3-4d，種子即萌發(fā)。

11. 在培養(yǎng)室培養(yǎng) 7-10d，幼苗長出兩片真葉以后，即可移栽到土里獲得擬南芥植株。

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